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    ELISA試劑盒組成及試劑配制

    更新時間:2013-09-26點擊次數:321
    ELISA試劑盒組成及試劑配制:
    1. 酶聯板:一塊(96孔)
    2.標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。如配制200 pg/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3. 樣品稀釋液:1×20ml。
    4.檢測稀釋液A:1×10ml。
    5. 檢測稀釋液B:1×10ml。
    6.檢測溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μl/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
    7.檢測溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
    8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
    9.濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
    10.終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
    11.覆膜:5張
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