概述ELISA試劑盒質量管理

更新時間：2013-09-26

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Elisa試劑盒簡單概述：
●ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測，既可以做定性試驗也可以做定量分析等優點，已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領域。ELISA試劑盒的影響因素較多，加強質量管理才能充分發揮其方法學的優點。

分析前質控
●人員培訓實驗是***作的，因此檢驗人員需經過培訓，熟練掌握本專業如下幾方面的技術知識：
◎檢驗項目的基本原理（ELISA試劑盒原理）；
◎臨床意義；
◎熟悉檢測技巧，了解易出差錯的環節及難點；
◎熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；
◎ 熟悉檢測儀器的原理及性能；掌握數據處理的能力和質量控制知識。
◎某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經有關部門組織的專門培訓班，考試合格后持證上崗。

分析前質控
1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術應用于臨床檢驗發展為ELISA試劑盒技術。
特點：在固相表面組裝免疫活性物質形成"免疫吸附劑"
酶標記免疫活性物質，進行信號放大；
有二步溫育反應二次洗滌過程；
靈敏度特異性相對較高。
局限性：只能檢測到ng水平
精密度差（批內CV15-20%）；
線性范圍窄（一個數量級）；
存在"HD-HOOK"效應。

ELISA試劑盒原理
●根據檢測目的和操作步驟不同有三種基本方法。
●雙抗體（原）夾心法檢測抗原（體）的常見方法，應用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標抗體檢測溶液中的抗原（適用于二價以上抗原,不能測小分子半抗原）。
●間接法檢測抗體的方法，利用酶標記的抗抗體（第二抗體）檢測已與固相抗原結合的抗體。
●競爭法檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，結果如待測抗原含量越多，與固相抗體結合的酶標抗原就越少，顯色越淺，二者呈負相關。

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